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當前位置:首頁技術文章液相色譜儀按分離機理的分類

液相色譜儀按分離機理的分類

更新時間:2013-01-18點擊次數:3322
  液相色譜法按分離機理的不同可分為以下幾類:
  
  (一)吸附色譜法(adsorptionchromatography)以吸附劑為固定相的色譜方法稱為吸附色譜法。使用zui多的吸附色譜固定相是硅膠,流動相一般使用一種或多種有機溶劑的混合溶劑。在吸附色譜中,不同的組分因和固定相吸附力的不同而被分離。組分的極性越大、固定相的吸附力越強,則保留時間越長。流動相的極性越大,洗脫力越強,則組分的保留時間越短。
  
  (二)液-液分配色譜法(liquid-liquidchromatography)液-液分配色譜的固定相和流動相是互不相溶的兩種溶劑,分離時,組分溶入兩相,不同的組分因分配系數(K)的不同而被分離。目前廣泛使用的化學鍵合固定相是將固定液的官能團鍵合在載體上而制成的,使用化學鍵合固定相的色譜方法(簡稱鍵合相色譜法)可以用分配色譜的原理加以解釋。鍵合相色譜法在HPLC中占有極其重要的地位,是應用zui廣的色譜法。按照固定相和流動相極性的不同,分配色譜法又可分為正相色譜法和反相色譜法兩類。
  
  1.正相色譜法(normalphasechromatography)固定相極性大于流動相極性的分配色譜法稱為正相分配色譜法,簡稱為正相色譜法。氰基鍵合硅膠、氨基鍵合硅膠等極性的化學鍵合固定相是正相色譜常用的固定相,正相色譜的流動相一般為極性較小的有機溶劑。在正相色譜中,極性小的組分由于K值較小先流出,極性較大的組分后流出。正相色譜法用于溶于有機溶劑的極性及中等極性的分子型物質的分離。
  
  2.反相色譜法(reversedphasechromatography)流動相極性大于固定相極性的分配色譜法稱為反相分配色譜法,簡稱為反相色譜法。反相色譜法使用非極性固定相,zui常用的非極性固定相是十八烷基硅烷鍵合硅膠,還有辛烷基硅烷鍵合硅膠等。流動相常用水與甲醇、乙腈或四氫呋喃的混合溶劑。在反相色譜中極大的組分因K值較小先流出色譜柱,極性較小的組分后流出。流動相中有機溶劑的比例增加,流動相極性減小,洗脫力增強。反相色譜法是目前應用zui廣的液相色譜法。
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