1）樣品提取：取粉碎并過20目篩的大豆樣品20g（至0.1g）于250mL具塞錐形瓶中，加入甲醇-水（體積比為80：20）混合溶液50mL，超聲提取10min。在鋪有助濾劑的布氏漏斗中減壓抽濾。用甲醇-水（體積比為80：20）混合溶液20mL沖洗錐形瓶及濾渣，合并濾液，移人分液漏斗，加入5％氯化鈣溶液80mL，用三氯甲烷萃取3次（50mL，40mL，40mL）。萃取液過無水硫酸鈉脫水，置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器中于4O℃下減壓濃縮至近干，移人填充柱內(nèi)凈化。

（2）樣品凈化：用干裝法裝柱。在玻璃柱（20cmx1.5cmi．d．）內(nèi)依次加入1g助濾劑、2g硅膠、0.5g活性炭及少許無水硫酸鈉。先用20mL乙酸乙酯-石油醚（體積比為95：5）混合淋洗液預(yù)淋玻璃柱，棄去淋洗液，爾后用3×1mL混合淋洗液溶解濃縮物并轉(zhuǎn)移到柱中，然后用70mL乙酸乙酯-石油醚（體積比為95：5）混合溶液淋洗，棄去前5mL淋洗液，收集以后流出的淋洗液，在4O℃下減壓濃縮至近干，用氮氣流吹干后準確加入甲醇定容至lmL，供HPLC測定。

2結(jié)果與討論

2．1提取方法的選擇

分別對大豆的提取方式與條件進行試驗，比較了振蕩提取和超聲波提取的效果。結(jié)果表明，振蕩提取40min和超聲波提取10min的效果是一致的。為了節(jié)約時間，確定采用超聲波提取10min。